来源 : 重组核酸酶,基因工程生产,大肠杆菌表达。
一. 产品简介
BenzoNuclease 是一种来自于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),经基因工程改造的核酸内切酶。BenzoNuclease可降解双链、单链、线状、环状的DNA和RNA,完全将核酸降解成3~5个碱基长度的5′-单磷酸寡核苷酸。因其能高效降解任何形式的 DNA 和 RNA,又被称为“全能核酸酶”。
无论在实验室研究还是在工业级生产的过程中,BenzoNuclease是去除生物制品中所有形式DNA和RNA的一种有效工具酶。通过高效的核酸去除,可显著提升后续实验、生产的效果及产量,性能优于其他核酸去除方法。
二. 产品特性
项目 | 标准 | 方法 |
外观 | 无色通明溶液 | 目测检测 |
活性 | ≥250KU/ml | 降解鲑鱼精子DNA法 |
纯度 | ≥99% | SDS-page电泳检测 |
细菌内毒素 | ≤0.25EU/KU | 药典检测方法 |
宿主DNA | ≤10ppm | 荧光PCR方法 |
宿主残余蛋白(HCP) | ≤50ppm | 药典检测方法 |
微生物限度 | 符合规定 | 药典检测方法 |
分子量 | ~28KD | SDS-page电泳检测 |
活性定义:在37℃,pH 8.0反应条件下,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
三. 使用方法
1.细胞处理:a.贴壁细胞去除培养基,用 PBS 洗后,1mLRIPA 裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加1-2uL(0.1-1μl)核酸酶,室温或冰上孵育 5-30min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。b.悬浮细胞离心收集后,在离心管中加 1mLRIPA 裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加1-2uL(0.1-1μl )核酸酶,室温或冰上孵育 5-30min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
2.组织样品:将 30-100mg 动物或者植物组织研磨充分后,加入 100-200uL 裂解液,同时加入 0.5-1uL 核酸酶,室温或冰上孵育 5-30min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
3.大肠杆菌或者其他细菌:细菌离心收集后,用裂解液裂解或者研磨破碎后,每 1mL 加 0.5-1uL 核酸酶,室温孵育 5-30min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
注:若溶液为高盐(>0.3MNaClass)溶液,偏酸性或偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶量或者孵育时间。
反应条件 | 最佳 | 有效 |
Mg2+ | 1-2Mm | 1-10mM |
PH | 8.0-9.2 | 6.0-10.0 |
温度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100mM | 大于100mM |
BME | 0-100mM | 大于100 mM |
钠离子、钾离子等 | 0-20mM | 0-150 mM |
PO43- | 0-10mM | 0-100mM |
最佳条件为酶活保留90%以上的反应条件;有效条件为酶活保留15%以上的反应条件。
四. 储存和运输稳定性
储存稳定性:-20℃或以下保存,两年有效。
运输稳定性:冷藏运输,活性稳定。
注意:本产品不建议-800C 保存,反复冻融会降低本产品的酶活性。
五. 产品优势
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产(稳定生产供应1亿-10亿单位产品),可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全符合GMP指导原则。
质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。
六. 相关产品
重组sumo酶;
重组TEV酶;
重组肠激酶。
仅供科研生产使用,不能用于人体。